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中科院上海生化所 98 MOLECULAR GENETICS Paper

一．名詞解釋
拓撲異構(gòu)酶
組成型異染色質(zhì)（constitutive heterochromation）
阻遏蛋白
RT-PCR 遺傳重組（廣義和狹義的）
衰減子

二．是非
1． 大腸桿菌染色體是一條由數(shù)百萬個堿基對組成的環(huán)狀DNA
2． λ噬菌體能否整和進入宿主DNA或從宿主DNA上切除，主要取決于宿主細胞中λ噬菌體整和酶int的存在形式，同時還涉及到其他的一些蛋白因子。
3． Z型構(gòu)象的DNA不存在于天然狀態(tài)的細胞中
4． 生物體的結(jié)構(gòu)與功能越復雜，其DNA的C值越大，但在結(jié)構(gòu)與功能很相似的同一類生物中，在親緣關系十分接近的物種之間，它們的DNA C值是相似的
5． 在大腸桿菌，哺乳動物和人線粒體中，終止密碼都是UAA，UAG兩種。
6． 反義RNA通過互補的堿基與特定的mRNA結(jié)合，從而抑制mRNA的翻譯，因而反義RNA的調(diào)空機制顯然只是翻譯水平特異的
7． 轉(zhuǎn)座過程通常是指DNA中的一段特殊序列（轉(zhuǎn)座元）在轉(zhuǎn)座酶以及其它蛋白因子的作用下，從DNA分子中的一個位置被搬移到另一位置或另一DNA分子中
8． DNA修復系統(tǒng)的作用是保證DNA序列不發(fā)生任何變化
9． 持家基因（house keeping gene）是指那些在哺乳類各類不同細胞中都有表達的基因這組基因的數(shù)目約 在一個萬左右
10． 轉(zhuǎn)座元兩端通常都存在同向重復序列和倒轉(zhuǎn)重復序列，研究表明這些序列對于轉(zhuǎn)座元的轉(zhuǎn)座作用非常重要
11． 熒光原位雜交（FISH）可以把同一個基因定位到特定的染色體位置上去
12． 在真核生物核內(nèi)。五種組蛋白（H1 H2 aH2b H3 和H4）在進化過程中，H4極為保守，H2A最不保守
13． 還原病毒的線形雙鏈DNA合成時， 結(jié)合在病毒RNA3末端的用于第一鏈DNA合成的引物是在細胞中正常的TRNA分子
14． RNA聚合酶1負責轉(zhuǎn)錄TRNA和5SRNA，其啟動子位于轉(zhuǎn)錄的DNA序列之內(nèi)，稱為下游啟動子
15． 條件突變?nèi)鐪囟让舾行屯蛔儾豢杀灰种苹�因所抑�?br> 16． 多DNA酶1的優(yōu)先敏感性不僅僅表現(xiàn)在活躍基因的轉(zhuǎn)錄區(qū)，而且也表現(xiàn)在活躍基因兩側(cè)的DNA區(qū)段上
17． 作為一個基因克隆的載體，主要是由藥物抗性基因， 供插入外源 DNA片段的克隆位點和外源DNA片段插入篩選標志這三大部分組成的
18． 堿基序列排列方式可以嚴重影響DNA的解鏈溫度
19． 大多數(shù)氨基酸由一個以上的密碼子所編碼，在A+T含量和G+C含量沒有顯著差異的基因組中，不同密碼子的使用頻率就近似相同了
20． 在克隆載體PUC系列中，完整的LACZ基因提供了一個外源基因插入的篩選標記，蘭色的轉(zhuǎn)化菌落通常表明克隆是失敗的

三．
1． 下列--種堿基錯配的解鏈溫度最高
A T-T B G-G C A-C D G-A
2． 目前 在轉(zhuǎn)基因小鼠中常用的基因剔除技術（gene knockout）是根據(jù)--原理而設計的 A 反義核苷酸的抑制作用B轉(zhuǎn)座成分的致突變作用C離體定向誘變D同源重組
3． 端粒酶與真核生物線形DNA末端的復制有關，它有一種--ARNA聚合酶（ RNA polymerase）B逆轉(zhuǎn)錄酶（reverse transcriptase）C核酸酶（nuclease）D 核糖核酸酶（ribonuclease rnase）
4． 細胞合成的分泌蛋白質(zhì)在N端都有一段信號肽，這些信號肽的長度是--個氨基酸殘基
A大于100 B15到30 C約50 D小于10
5． 真核生物復制起始點的特征包括--
A富含GC區(qū) B富含AT區(qū) CZ DNA D無明顯特征
6． 細菌中，同源重組發(fā)生在一些熱點周圍，這和-- 在chi位點上的單鏈內(nèi)切酶活性有關A RecAB RecBCRecCDRecD
7． HMG14和HMG17是屬于--
A一類分子量不大的堿性蛋白質(zhì)B一類分子量很大的非組蛋白C一類分子量不大的非組蛋白D一類RNA聚合酶
8． RNA修復體系可以使核酸突變頻率下降--A10倍B1000倍C百萬倍D不影響突變頻率
9． 真核生物DNA中大約有百分之2-7的胞嘧啶存在甲基化修飾，絕大多數(shù)甲基化發(fā)生--二核苷酸對上 A CC B CT C CG D CA
10．Holliday模型是用于解釋--機制的
A RNA逆轉(zhuǎn)錄酶作用 B 轉(zhuǎn)座過程C 嚕噗切除D同源重組
11.化學誘變的結(jié)果與--因素有關
A劑量 B細胞周期 C劑量時間率（Dose rate）D上述各因素
12．外源基因在大腸桿菌中高效表達受很多因素影響，其中S-D序列的作用是：
a提供一個mRNA轉(zhuǎn)錄終止子
b提供一個mRNA轉(zhuǎn)錄起始子
c提供一個核糖體結(jié)合位點
d提供了翻譯的終點
13．真核生物的組蛋白上的修飾作用，除了乙酰基化、甲基化和磷酸化外，還有一種特殊的修飾作用，即泛素化，這一個泛素（ubiquitin）與哪一種組蛋白連接？
A．H3 B。H2B C H2C D H4
14．胰島素通常以融合蛋白的方式在大腸桿菌中表達，利用融合處有一個甲硫氨酸殘基可以用--的方法將胰島素從融合蛋白上切下來
A，氫氟酸裂解 B。羥氨裂解 C，蛋白水解酶 D，溴化氰裂解

四、問答題
1簡述DNA的C值以及C值矛盾（C Value paradox）.
2根據(jù)現(xiàn)在的研究，RecA在細菌DNA重組過程中主要起什么作用？它與重組有關的活性有哪些?
3簡述逆轉(zhuǎn)錄酶發(fā)結(jié)構(gòu)與功能
4簡述突變熱點的定義及其可能的機制
5簡述染色體端粒的結(jié)構(gòu)與功能
6基因工程的發(fā)展主要得益于那些重大發(fā)現(xiàn)和發(fā)明？你對基因工程將來的發(fā)展方向有何看法？

中科院上海生化所 2001 Molecular Genetics Paper

一.名詞解釋

1.基因組
2.原病毒
3.分子雜交
4.啟動子
5.端粒酶
6.副密碼子

二.是非

1.半保留復制是指有50%的基因是新合成的，另50%的基因是上一代的。
2.微生物全基因組測序的進展完全證明了真核生物是從原核生物直接進化而來。
3.φχ174 phage 是一種很小的 E.coli phage,它有5386個核苷酸,其DNA 為
雙鏈環(huán)狀.
4.調(diào)節(jié)基因一般都位于operon附近,這種構(gòu)造有利于調(diào)節(jié)基因?qū)�operon的控制.
5.體外分子進化是使核酸分子在體外經(jīng)過多次酶催化的擴增,從而積累突變的過程.
6.SP01是枯草桿菌的phage,它通過對RNA pol δ因子的更換實現(xiàn)其早,中,晚基因
表達的時序控制,這和T7噬菌體的生活方式非常類似.
7.細菌中衰減子的作用方式是用翻譯的手段來控制轉(zhuǎn)錄.
8.RNA病毒又稱為還原病毒.
9.Ti質(zhì)粒來源于低等植物，目前被廣泛用于植物基因工程。
10.Ac-Ds 是玉米中的一組轉(zhuǎn)座控制成分，其中 Ds 來源于Ac序列，Ac對Ds的作用是順式的。
11.只有用相同的內(nèi)切酶獲得的DNA片段末端才能用DNA連接酶連接起來。
12.在原核生物基因表達的正調(diào)控系統(tǒng)中，加入無輔基誘導蛋白后基因活性被開啟。
13.由于密碼子存在搖擺性，使得一種tRNA分子常常能夠識別一種以上同一種氨基酸的密碼子 。
14.原核生物中封閉性啟動子復合物為二元復合物，開放性啟動子復合物為三元復合物。
15.腳印法（footprinting）是用于研究protein與DNA相互作用的一種技術。
16.增強子的作用具有細胞或組織的特異性。
17.SRP （信號識別顆粒）能夠與ribosome 結(jié)合并使肽鏈的起始暫時受阻，所以是翻譯的負調(diào)控因子。
18.mRNA內(nèi)部不存在甲基化的核糖核酸。
19.在真核生物的線粒體和葉綠體中的少數(shù)RNA pol都是核基因編碼的。
20.topoisomerase 可以產(chǎn)生和消除超螺旋狀態(tài)。

三.選擇

1.原核生物中同一轉(zhuǎn)錄元里近基因的一個無義突變能阻止遠基因的表達稱為無義突變的極性效應，該現(xiàn)象
與RNA pol的哪一個亞基相關？
a. α b. β c.σ d.ρ

2. 真核生物的翻譯起始復合物在何處形成？
a. 起始密碼子AUG處
b. 5‘末端的帽子結(jié)構(gòu)
c. TATA框
d. CAAT 框

3.下列何種生物形式的基因組中沒有內(nèi)元？
a，酵母 b，四膜蟲 c T4噬菌體 d，大腸桿菌

4 下列哪種酶不能用來聚合酶鏈式反應PCR？
a，Taq DNA合成酶 b T7 DNA合成酶 c，引物酶 d，klenow片段

5.1微克的長度為1kb的DNA片段含有多少個分子？
a.~10^9 b.~10^12 c.~10^5 d.~6*10^21

6.在真核生物的染色體中，DNA約占多少？
a.66% b. 6% c. 27% d.80%

7.非洲爪蟾體細胞中rDNA拷貝數(shù)約有500個，而在卵母細胞中的拷貝數(shù)約增加了———倍，可以用來轉(zhuǎn)錄合成
卵裂所需要的ribosome。
a.1000 b.2000 c.4000 d.400

8.Lambda phage 的阻遏蛋白和cro蛋白均通過———的結(jié)構(gòu)與DNA結(jié)合。
a. Cys-His ZF b.cys-cys ZF c. α-helix-turn-α-helix d.Leu zipper

9 真核生物組蛋白有一種特殊修飾作用，即組蛋白——上連接一個ubiquitin，這種修飾作用最初在
鼠肝中發(fā)現(xiàn)。
a.H2b b.H1 c.H2a d .H4

10.在E.coli中用于表達外源基因的vector在啟動子下游通常含有S-D序列，這個序列的作用是——。
a 為ribosome提供識別位點。
b 提供轉(zhuǎn)錄位點。
c 增強啟動子活性。
d 提高RNA穩(wěn)定性。

11.還原病毒基因組結(jié)構(gòu)有很高的相似性，通常都含有——三類基因。
a.gal,pol.env
b.gal,src,ori
c.pac,lac,LTR
d.gin,tat,cin

12.鼠類的preproinsulin ，前胰島素原Ⅰ基因是一個——。
a 半處理的mRNA返座產(chǎn)物
b 假基因
c 轉(zhuǎn)座子序列
d 原病毒序列。

13.下列何種factor不會誘變DNA ？
a .亞硝酸 b . UV c .丫啶橙 d. 飽和脂肪乳劑

14.以下哪種情況不屬于同源重組？
a 細菌接合
b 非姊妹染色體交換
c 細菌的轉(zhuǎn)導
d 細菌plasmid的轉(zhuǎn)化。

四.問答題。
1.根據(jù) DNA復性動力學研究，DNA序列可以分成哪幾種類型？并加以舉例說明。
2.不同密碼子使用頻率的差異是如何影響基因表達量的？
3.簡述突變與堿基多樣性的關系。
4.常用順式作用和反式作用來描述基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控，試說明這兩種作用的含義。
5.細菌的半乳糖operon在存在glucose時仍然可以被誘導，試解釋之。并說明其對細菌正常生理過程的意義。
6.HGP即將完成，對下一步的研究談談你的看法。

中國科學院上海生化與細胞所2002年招收碩士研究生入學考試：［分子遺傳學(上海命題)］"標準答案"

考 試 科 目 ：分子遺傳學(上海命題)
報 考 單 位 ：中科院上海生命科學院
報 考 方 向 ：神經(jīng)生物學
1． 以上各項除試卷密呈外必須填寫清楚。
2． 答題必須一律寫在試卷上，并寫清題號。
3． 字跡清楚，保持卷面清潔。
4． 試題隨試卷交回。
5． 草稿紙另發(fā)，考試結(jié)束后統(tǒng)一收回。
6． 閱卷時由招生單位按虛線右半頁裁下，另編試卷密號。

一、名詞解釋：(6題，每題3分，共18分)
1． 分子伴侶(molecular chaperone)
2． 核糖核酸質(zhì)酶(ribozyme)
3． 光復活
4． 基因組(genome)
5． 異染色質(zhì)化
6． 誘導物(inducer)

二、是非題：(20題，每題1分， 共20分)，答"是"寫(+)，答"非"寫(-)。
1．拓撲異構(gòu)酶是一類改變DNA結(jié)構(gòu)的酶，因此在反應中總是需要能量的。 (-)
2．RNA聚合酶I是轉(zhuǎn)錄核糖體RNA的。 (+)
3．自然界每個基因的第一個密碼子，都是ATG，編碼甲硫氨酸。 (-)
4．蛋白質(zhì)由二十種氨基酸組成，包括胱氨酸。 (-)
5．有信號肽的蛋白就能被分泌到細胞外。 (-)
6．大腸桿菌DNA聚合酶I具有的5'-3'外切酶活性也可以以RNA為底物 (+)
7．基因組DNA復制時，先導鏈的引物是DNA，后隨鏈的引物是RNA (-)
8．人腺病毒基因組DNA復制時DNA5'端的結(jié)合蛋白起到了最初的引物作用 (+)
9．新生DNA鏈上的甲基化修飾在幫助DNA修復系統(tǒng)識別親本鏈過程中起決定作用。 (-)
10．SV40DNA在復制后老的組蛋白都分布在先導鏈上。 (+)
11．真核生物的染色體中，DNA約上80%，其余為RNA的蛋白質(zhì)。 (-)
12．在成人血紅蛋白中，大約有97%都是α2β2，此外還有約2%的α2δ2以及兒階段遺留下來大約1%的α2γ2 (+)
13．哺乳動物某一類型細胞中，只有大約10%的mRNA各類是該類型細胞所特有的，這類基因稱為持家基因 (-)
14．端粒酶與真核細胞內(nèi)染色體DNA末端復制有關，它是一種逆轉(zhuǎn)錄酶 (+)
15．活躍轉(zhuǎn)錄的基因均位于常染色質(zhì)中，處于異染色質(zhì)中的基因通常不表達。 (+)
16．Tn10轉(zhuǎn)座到一個新的DNA靶點時，在靶點兩側(cè)形成倒轉(zhuǎn)重復序列。 (-)
17．聯(lián)會絲復合體的形成是真核生物同源重組的充分必要條件 (+)
18．逆轉(zhuǎn)錄酶以RNA或DNA為模板以tRNA為引物合成DNA (-)
19．第二類限制性酶識別的序列都是廻文結(jié)構(gòu)。 (-)
20．Rec BCD蛋白能在Chi位點發(fā)揮單鏈內(nèi)切酶活性而產(chǎn)生一條單鏈尾巴 (+)

三、選擇題：(14題，每題1分，共14分)。
1．雙鏈DNA的穩(wěn)定性是由_____決定的。 (D)
A A/T比例 B DNA修飾
C 核苷酸排列 D 上述所有原因總和
2．蛋白質(zhì)的翻譯后修飾主要包括____。 (D)
A 乙�；� B 糖基化 C 磷酸化 D 上述各種修飾
3．內(nèi)含子的主要功能不包括下列哪一種？ (D)
A 作為Ribozyme B 作為基因調(diào)節(jié)區(qū)域
C．作為復制起始區(qū) D 作為反義核酸
4．信號識別顆粒(Signal recognition particle)的作用是____。 (B)
A 指導RNA剪切 B 引導分泌蛋白質(zhì)跨膜
C 指引核糖體大小亞基結(jié)合 D 指導轉(zhuǎn)錄終止
5．大腸桿菌中哪種酶是承擔基因組DNA復制的聚合酶 (C)
A Pol I; B Pol II; C Pol III D Klenow 酶
6．E. Coli 的修復內(nèi)切酶能識別___？ (D)
A 由紫外光引發(fā)的胸腺嘧啶二聚體
B 光修復酶
C未甲基化的GATC
D 變形的DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)
7。選用下列哪個誘變劑較易引起移碼突變？ (B)
A 硫酸二甲酯 B 吖啶橙 C 亞硝酸 D 羥胺
8．λ噬菌體的阻遏蛋白和cro蛋白均通過哪種結(jié)構(gòu)與DNA結(jié)合？ (C)
A Cys-His鋅指 B Cis-Cys鋅指
C α-螺旋-轉(zhuǎn)角α-螺旋-轉(zhuǎn)角 D Leu拉鏈
9．在真核生物染色體上的調(diào)度重復序列，可達幾百個對幾百萬人拷貝，期中一些重復幾百次的基因如：(C)
A 組蛋白基因 B珠蛋白基因
C rRNA基因 D 細胞色素C基因
10．人類的β簇珠蛋白基因分布在50kb范圍的DNA上，是按照___次序排列的。 (A)
A 5'-ε-γG-γA-δ-β-3' B 5'-γG-ε-γA-δ-β-3'
C 5' -ε-γA-γG-δ-β-3' D 5' -β-δ-γA-γG -ε -3'
11.插入序列(IS)編碼____。 (A)
A 轉(zhuǎn)座酶 B 逆轉(zhuǎn)錄酶
C DNA聚合酶 D 核糖核酸酶
12．λ噬菌體侵入大腸桿菌細胞后通過___而進入溶源狀態(tài)。 (B)
A 同源重組 B 位點特異性重組
C 轉(zhuǎn)座作用 D 異常重組
13．Holliday 中間體在____過程中產(chǎn)生 (A)
A 同源重組 B 轉(zhuǎn)座
C 逆轉(zhuǎn)錄 D λ噬菌體DNA整合
14．下列哪個操縱元中沒有衰減子序列？ (B)
A trp操縱元 B lac操縱元
C his操縱元 D thr操縱元

四、問答題： (6題，每題8分，共48分)
1． 簡述真核生物中編碼蛋白質(zhì)的基因的結(jié)構(gòu)。
2． 請設計一個實驗來證明DNA復制是以半保留方式進行的。
3． 簡述真核細胞內(nèi)核小體與核小體核心顆粒的結(jié)構(gòu)。
4． 簡述酵母轉(zhuǎn)錄激活因子GCN4是通過哪一種結(jié)構(gòu)模式(pattern)*與DNA相互結(jié)合進行調(diào)節(jié)作用的。
*應為Motif
5． 闡述酵母Tyr1成分的結(jié)構(gòu)及其轉(zhuǎn)座機理。
6． 闡述同源重組的機理。