臺灣成功大學(xué) 蛋白質(zhì)研究課程
課程授課大綱及內(nèi)容:
蛋白質(zhì)體學(xué)研究的相關(guān)技術(shù)有蛋白質(zhì)分離、質(zhì)譜分析、生物信息、蛋白質(zhì)數(shù)組等,目前被認(rèn)為研究蛋白質(zhì)體最成熟的工具是二維凝膠電泳(two-dimensional gel electrophoresis, 2D-GE)的分離機(jī)制加上質(zhì)譜儀(mass spectrometry, MS)的蛋白質(zhì)身份鑒定(protein identification)。二維凝膠電泳利用等電位點(diǎn)聚焦(iso-electric focusing, IEF)與SDS-PAGE (sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis)兩種原理,能將直接從組織或培養(yǎng)細(xì)胞萃取出來、成千上百的蛋白質(zhì)混合物作高分辨率的分離。經(jīng)過比較正常與有疾病的組織或細(xì)胞(或是在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)比較控制組與實(shí)驗(yàn)組)之二維凝膠電泳結(jié)果,看的出有變化的蛋白質(zhì)就可以用質(zhì)譜儀來作身份鑒定。
質(zhì)譜分析技術(shù)能對大量蛋白質(zhì)進(jìn)行靈敏度極高的身份鑒定,它的發(fā)展革命性地改變了科學(xué)家研究蛋白質(zhì)體的方式。利用質(zhì)譜儀來鑒別蛋白質(zhì)的原理牽涉到如何將質(zhì)譜儀得到的數(shù)據(jù)與蛋白質(zhì)或基因序列數(shù)據(jù)庫作高效率的比對,經(jīng)由比對過程找到該蛋白質(zhì)與基因數(shù)據(jù)庫中某一個(gè)(或多個(gè))基因的對應(yīng)關(guān)系。所需利用的質(zhì)譜儀設(shè)備又可以分為介質(zhì)輔助雷射脫附游離法(matrix-assisted laser desorption ionization,MALDI) 與電灑游離法(electropsray ionization,ESI)兩種,目前該兩種質(zhì)譜儀所能提供的數(shù)據(jù)各有優(yōu)勢,且具有互補(bǔ)性。